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新城疫血凝抑制試驗指導生產(chǎn)應注意的幾個問題
實際生產(chǎn)中，養(yǎng)殖環(huán)境問題已越來越嚴重，雞體已處于各種病源的重重包圍之中，管理粗放，免疫力低下，加之新城疫毒株的變異，強、中、低毒株共存，就是有100％的免疫保護，對野外強毒也難以得到100％保護。所以在用新城疫血凝抑制試驗(HI)指導生產(chǎn)中，不能光看實驗數(shù)據(jù)，而要和實際飼養(yǎng)環(huán)境情況聯(lián)系起來。特別是對于那些污：染嚴重的老場，有資料報道，抗體滴度至少要達到10log2以上，才能有較安全的保護。在生產(chǎn)中，養(yǎng)雞場不能將疫苗免疫看作“一苗定神針”的萬全之策，過分依賴疫苗。
二 要重視局部免疫的作用
實踐證明，高新城疫HI抗體水平的雞群可能通過呼吸道感染新城疫野毒；相同水平的HI抗體對新城疫保護效果不盡相同，可能就是細胞免疫、黏膜免疫作用的結果。事實上，呼吸道的局部免疫只有在直接接觸外源性抗原后才能引起免疫應答。據(jù)試驗，經(jīng)氣霧免疫后氣管醫(yī)學全在線www.gydjdsj.org.cn、支氣管的沖洗物中含有相當高的IgA和IgG，這兩種抗體均能中和病毒，阻止NDV侵入和吸附，從而在呼吸道形成有效的防御屏障。通過弱毒疫苗氣霧免疫使在氣管黏膜中有IgA去封鎖住病毒入侵大門是非常必要的。所以在生產(chǎn)中，每隔2~3個月定期噴霧接種弱毒疫苗對控制典型和非典型ND是很有必要的。
三 要認真對待母源抗體的影響
在生產(chǎn)中，普遍認為雛雞早期有母源抗體的保護，過早免疫會對新城疫免疫形成干擾，影響免疫效果，所以在制定程序上一般都將早期免疫安排在7～10日齡。這一做法在當前高感染壓力情況下，存在一定的弊端。在養(yǎng)殖環(huán)境高污染區(qū)，較高的母源抗體也難以阻止新城疫的發(fā)病，早期免疫已成為免疫程序中必不可少的。早期免疫確實會對疫苗免疫產(chǎn)生影響，但主要影響的是體液免疫，對雛雞早期的活苗滴鼻、點眼、氣霧免疫產(chǎn)生的局部黏膜和細胞免疫影響較少。據(jù)用標準強毒株F48E9 106．0ELD50／羽進行攻毒，通過攻毒保護試驗結果表明1日齡免疫效果明顯優(yōu)于未免疫組。因此在現(xiàn)實高感染的壓力下，盡量把新城疫免疫提前到最初的三天進行，及早在呼吸道等黏膜部位建立起免疫屏障，是很有必要的。
四 對現(xiàn)行標準評價體系的商榷
新城疫血凝抑制試驗(HI)標準規(guī)定HI≥510g2時，免疫合格，群體免疫合格率達到70％以上時，就不會出現(xiàn)新城疫大面積流行。這一標準在過去是可行的，但在當前養(yǎng)殖環(huán)境普遍惡化，疫情風險加大的背景下，這一標準顯得有點偏低。有試驗表明，在抗體水平較均勻的情況下，在HI抗體高于6log2時，才能使雞在強病毒攻擊時不出現(xiàn)明顯的臨診癥狀，但蛋雞的產(chǎn)蛋量仍會嚴重下降；在HI抗體高于8log2時才可避免出現(xiàn)呼吸道癥狀并防止雞排出病毒，但蛋雞仍會出現(xiàn)產(chǎn)蛋下降；在HI抗體高于10log2時才可完全防止產(chǎn)蛋下降的現(xiàn)象。所以在生產(chǎn)中，僅僅保證雞群HI抗體合格是不夠的，筆者認為，在重視局部免疫(弱毒疫苗氣霧或滴眼、滴鼻)的基礎上，適當提高循環(huán)抗體水平(雛雞階段、產(chǎn)蛋前中期使用油乳劑苗，并適當加大劑量)是有必要的。從群體來說，只關注抗體的平均值也是不夠的，離散度、最低值也很重要，因為抗體高低不一，不均勻整齊的話，病毒通過突破抗體比較低的一部分雞體，感染排毒，造成病毒數(shù)量增多，病毒毒力增強，這一放大效應，在一定條件下就可使雞群發(fā)病。
五 在檢測中，要盡量減少試驗偏差，保證數(shù)據(jù)準確
1 采樣要有代表性，樣品質(zhì)量達標
根據(jù)檢測目的，從1日齡測定母源抗體開始，定期采樣監(jiān)測，早期每隔1～2周監(jiān)測一次，以后隨日齡增大每3～4周測定一次，采樣時，應注意從不同的位置抓雞，而且要具有足夠的數(shù)量和一定代表性，一般萬只以上雞群按0．5％采樣，小型雞群按1％采樣。只有合理采樣，個體才能反映群體的整體狀況，才能達到檢測的目的。另外血清的保存、質(zhì)量也很關鍵，采集的血清要在盡可能短的時間內(nèi)送達檢測，反復凍融、腐敗變質(zhì)、溶血、膠狀化等，都會影響檢測結果。
2 減少實驗室操作影響
新城疫血凝抑制試驗雖然操作簡單，但因環(huán)節(jié)多、靈敏度高醫(yī)學全在線網(wǎng)站www.gydjdsj.org.cn，很容易出現(xiàn)操作上的偏差，誤讀誤判，給生產(chǎn)帶來損失，必須引起注意。如制備紅細胞的雞只是否受到新城疫感染或合有新城疫抗體；病毒懸液和紅細胞懸液沒有及時搖勻，加入時濃度高低不一；感作最適宜的環(huán)境溫度是20～25℃，當溫度過低，出現(xiàn)結果就要慢。環(huán)境溫度超過30 2時，試驗結果出現(xiàn)的要快，往往在15分鐘左右就可讀數(shù)。一旦時間過長，結果就會消失，或使整板無凝集現(xiàn)象，給人一種誤象；凝集板是否清洗干凈等等，均可使檢測結果出現(xiàn)很大的偏差。
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