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執(zhí)業(yè)獸醫(yī)資格考試內容(獸醫(yī)臨床診斷學)輔導(3)：動物血液常規(guī)檢驗指導方法
目的和要求
掌握紅細胞及白細胞計數(shù)、血沉、血紅蛋白、紅細胞壓積容量的檢驗操作方法及注意事項，所得的結果應基本正確。
內容和方法
一、紅細胞計數(shù)
計算每mm8血液內所含紅細胞數(shù)目，稱為紅細胞計數(shù)(Redb100dcellcount，簡稱RBCcount)。其計數(shù)方法有顯微鏡計數(shù)法，光電比濁法、電子計數(shù)儀計數(shù)法等，目前臨床多采用在試管內稀釋血液后的顯微鏡計數(shù)法。
(一)原理
用適當?shù)南♂屢簩⒀鹤?00倍稀釋，滴入計算室后，在顯微鏡下計數(shù)，經(jīng)過換算即可求得每mms血液內的紅細胞數(shù)。經(jīng)稀釋液作用雖仍保留白細胞，但對紅細胞計數(shù)影響不大，因為一般情況下紅細胞與白細胞之比約為1000：1。
(二)器械和稀釋液
1.器械。器械包括以下方面。
(1)血細胞計中的計算板。常用的是改良紐巴(Neubauer)氏計算板。
(2)血細胞計中的紅細胞吸管。
(3)血蓋片。為血細胞計數(shù)專用玻片，厚度0.4mm，質地較硬。
(4)沙利氏吸血管、2ml刻度吸管，小試管、顯微鏡(圖9-1、圖9-2)。
2.稀釋液。稀釋液主要有以下兩種。
(1)0.85％氯化鈉溶液。
(2)赫姆(Hayem)氏液。由氯化鈉1.0g，結晶硫酸鈉5.0g，氯化高汞0。5g，蒸餾水加至
200ml，溶解后過濾備用。
(三)方法
1.試管稀釋法。用2ml刻度吸管吸取紅細胞稀釋液2ml，置于小試管中。
用沙利氏吸血管10mm3(0.01m1)，擦去管外余血，輕輕吹入試管內稀釋液底部，再吸上清液沖洗吸管3次，然后立即搖勻。
把血蓋片覆蓋于計算室上，用小玻棒沾取已混勻的紅細胞懸液一滴，輕輕接觸兩者結合處，使懸液自然流入計算室內。靜置3min后，即可計數(shù)。
在鏡下計數(shù)時，先用低倍(10×)物鏡找到計算室中央的大方格(紅細胞計數(shù)區(qū))，然后轉用高倍(40×)物鏡，計數(shù)中央大方格內四角的4個和中央的一個中方格，共計5個中方格(80個小方格)內的全部紅細胞數(shù)(或用對角線的方法數(shù)5個中方格)。
為避免重復和遺漏，計數(shù)時要按一定的順序進行。醫(yī)學全在線,搜集整,理gydjdsj.org.cn并且對壓在方格左邊和上邊線上的紅細胞均計在本格內，壓在右邊和下邊線上的紅細胞則不計在內，此即謂“數(shù)上不數(shù)下，數(shù)左不數(shù)右”的計數(shù)原則。
2.吸管稀釋法。用血細胞計內的特制紅細胞吸管吸血至o.5刻度外，再吸取稀釋液至101刻度，即血液呈200倍稀釋。然后，按上述方法在計算室上充液、觀察并換算。
3.換算法。如缺乏顯微鏡等條件或大批普查時，對馬的紅細胞數(shù)可利用六五型血沉管來粗略換算。
通常是以靜置1h的紅細胞柱高的刻度數(shù)(不是血沉值)，減2乘以系數(shù)18.4萬，也可以靜置24h紅細胞柱高的刻度數(shù)乘以21.6萬，即得每mm3血液內的紅細胞數(shù)。
(四)注意事項
血細胞計數(shù)都有一定的誤差，其原因主要是儀器本身和技術操作上的缺陷，以及血細胞在計算室中分布的固有誤差。為獲得正確結果，應注意如下幾方面的事項。
所有器材應清潔、干燥，符合標準，無損壞。試劑、血液符合檢驗要求。
吸血前混勻血液。吸稀釋液和吸血要準。血柱中應無氣泡，無血塊，同時不要吸得過多。管外壁血跡要擦凈。
充液前混勻檢液。檢液中應無沉淀。充液要均勻，不多，不少，無氣泡。充液后不再振動計算板。
鏡檢計數(shù)要嚴格按順序和原則進行(計數(shù)時誤差一個細胞，計算時則要誤差一萬個細胞)，至少要計數(shù)五個中方格內的紅細胞數(shù)，并且各中方格之間的紅細胞最高數(shù)與最低數(shù)之差不應超過20個。
操作要快；最好重復檢驗2-3次，以驗證準確性。
