| 公開(公告)號 | CN1502694A |
| 公開(公告)日 | 2004.06.09 |
| 申請(專利)號 | CN02145433.7 |
| 申請日期 | 2002.11.20 |
| 專利名稱 | 通過Cre-LoxP定點打靶體細胞克隆家畜作為乳腺生物反應器的研制 |
| 主分類號 | C12N15/09 |
| 分類號 | C12N15/09;C12N15/12;C12N15/87;C12N5/10;A01K67/00;A01K67/027 |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權 | |
| 申請(專利權)人 | 上海杰隆生物工程股份有限公司 |
| 發(fā)明(設計)人 | 成國祥;陳建泉;吳國祥;湯家銘;趙建陽 |
| 地址 | 201203上海市浦東新區(qū)張江蔡倫路88號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進入國家日期 | |
| 專利代理機構 | 上海專利商標事務所 |
| 代理人 | 徐迅 |
| 國省代碼 | 上海;31 |
| 主權項 | 一種定點打靶體細胞克隆家畜乳腺生物應器的制備方法，其特征在于，包括步驟：(a)通過基因打靶將一構建物定點引入家畜胎兒成纖維細胞，所述的構建物從5′→3′依次含有5′同源臂序列、LoxP序列、第一標記基因、和3′同源臂序列；(b)篩選得到LoxP序列定點整合的家畜胎兒成纖維細胞；(c)將打靶載體與Cre表達質(zhì)粒/Cre蛋白，共轉染LoxP序列定點整合的家畜胎兒成纖維細胞，所述的打靶載體從5′→3′依次含有LoxP序列、外源基因、第二標記基因、LoxP序列，并篩選得到定點整合有外源基因的成纖維細胞；(d)將步驟(c)的成纖維細胞的細胞核，移植入家畜去核卵母細胞，再生成克隆動物。 |
| 摘要 | 本發(fā)明公開了一種通過Cre-LoxP定點打靶體細胞克隆家畜來制備作為乳腺生物反應器的方法。它包括：(a)將含LoxP序列的構建物定點引入成纖維細胞；(b)篩選LoxP序列定點整合的細胞；(c)將含外源基因的打靶載體與Cre表達質(zhì)粒/Cre蛋白，共轉染LoxP序列定點整合的細胞，從而篩選得到定點整合外源基因的細胞；(d)再生成克隆動物。本發(fā)明還提供了相應的構建物和克隆細胞。本發(fā)明方法可高效地制備定點整合外源基因的乳腺生物反應器。 |
| 國際公布 |
