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從合成的RNA轉(zhuǎn)錄物制備雙RNA病毒的方法

公開(公告)號 CN1168500C  
公開(公告)日 2004.09.29  
申請(專利)號 CN97197688.0  
申請日期 1997.07.31  
專利名稱 從合成的RNA轉(zhuǎn)錄物制備雙RNA病毒的方法  
主分類號 A61K39/00  
分類號 A61K39/00;A61P31/14  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán) 1996.9.5 US 08/708,541  
申請(專利權(quán))人 馬里蘭大學(xué)-生物技術(shù)研究所  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 維克拉姆·N·瓦卡瑞爾;埃格伯特·蒙特  
地址 美國馬里蘭州  
頒證日  
國際申請 PCT/US1997/012955 1997.7.31  
進(jìn)入國家日期 1999.03.05  
專利代理機(jī)構(gòu) 中原信達(dá)知識產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司  
代理人 丁業(yè)平;王達(dá)佐  
國省代碼 美國;US  
主權(quán)項(xiàng) 用于制備活的雙RNA病毒的方法,包括下列步驟:制備雙RNA病毒基因組區(qū)段A和B的一個(gè)或多個(gè)cDNA,將所述的一個(gè)或多個(gè)cDNA轉(zhuǎn)錄以產(chǎn)生合成的RNA轉(zhuǎn)錄物,其中所述的RNA轉(zhuǎn)錄物是所述的區(qū)段A和B的正意義RNA轉(zhuǎn)錄物,用所述的合成的RNA轉(zhuǎn)錄物轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞,在培養(yǎng)基中培養(yǎng)所述的宿主細(xì)胞,和從所述的培養(yǎng)基中分離活的感染性雙RNA病毒。  
摘要 利用起源于克隆的DNA的合成轉(zhuǎn)錄物已經(jīng)開發(fā)了制備活的雙RNA病毒如感染性的囊病病毒(IBDV),一種雙RNA病毒家族的形成區(qū)段的雙鏈(ds)RNA病毒的系統(tǒng)。構(gòu)建了獨(dú)立的全長cDNA克隆,它們分別含有IBDV的RNA A和B區(qū)段的整個(gè)編碼和非編碼區(qū)。利用T7 RNA聚合酶對線性化質(zhì)粒體外轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生兩個(gè)區(qū)段的合成RNA。利用合并的兩區(qū)段的正意義轉(zhuǎn)錄物轉(zhuǎn)染非洲綠猴腎細(xì)胞,在早至轉(zhuǎn)染后36小時(shí)產(chǎn)生感染性病毒。dsRNA病毒的反遺傳系統(tǒng)的開發(fā)將大大簡化病毒基因表達(dá)的調(diào)節(jié)和病理的研究和產(chǎn)生新的活和失活疫苗的設(shè)計(jì)。  
國際公布 WO1998/009646 英 1998.3.12  
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