| 公開(公告)號(hào) | CN1154717C |
| 公開(公告)日 | 2004.06.23 |
| 申請(qǐng)(專利)號(hào) | CN96199175.5 |
| 申請(qǐng)日期 | 1996.12.19 |
| 專利名稱 | 改良無限增殖化人類皮膚細(xì)胞系和用于其生產(chǎn)的新型無血清培育基 |
| 主分類號(hào) | C12N5/08 |
| 分類號(hào) | C12N5/08;C12N5/00;C12N5/22 |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | 1995.12.21 US 08/576,483 |
| 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 雀巢制品公司 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | M·鮑爾;C·馬斯;A·馬爾諾伊 |
| 地址 | 瑞士沃韋 |
| 頒證日 | 2004.06.23 |
| 國(guó)際申請(qǐng) | PCT/EP1996/005812 1996.12.19 |
| 進(jìn)入國(guó)家日期 | 1998.06.19 |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 中國(guó)專利代理(香港)有限公司 |
| 代理人 | 齊曾度 |
| 國(guó)省代碼 | 瑞士;CH |
| 主權(quán)項(xiàng) | 無限增殖化人皮膚細(xì)胞以獲得無限增殖化角化細(xì)胞和黑素細(xì)胞的改良方法，包括以下步驟：(i)獲取人皮膚組織樣本；(ii)制備用于體外培養(yǎng)的所述皮膚樣本；(iii)從所述制備的皮膚樣本中獲取角化細(xì)胞和/或黑素細(xì)胞，將這些角化細(xì)胞和/或黑素細(xì)胞接種到備有外被層的培養(yǎng)皿上的無血清生長(zhǎng)培養(yǎng)基中，該外被層包含纖維粘連蛋白、I型膠原蛋白和BSA，該外被層促進(jìn)細(xì)胞附著和生長(zhǎng)；(iv)必要時(shí)更換培養(yǎng)基，以使培養(yǎng)細(xì)胞的鋪滿生長(zhǎng)達(dá)到最佳化，同時(shí)在培養(yǎng)皿上連續(xù)保持該外被層；(v)將角化細(xì)胞或黑素細(xì)胞轉(zhuǎn)移到同樣預(yù)鋪外被層的培養(yǎng)皿上的無血清選擇培養(yǎng)基；(vi)用逆轉(zhuǎn)錄病毒構(gòu)建體感染角化細(xì)胞或黑素細(xì)胞；(vii)將產(chǎn)生的無限增殖化角化細(xì)胞或黑素細(xì)胞轉(zhuǎn)移到同樣預(yù)鋪外被層的培養(yǎng)皿上的無血清增殖培養(yǎng)基上，這種培養(yǎng)基適用于無限增殖化角化細(xì)胞或黑素細(xì)胞的增殖；(viii)將產(chǎn)生的增殖角化細(xì)胞轉(zhuǎn)移到同樣預(yù)鋪外被層的培養(yǎng)皿上的含高鈣的無血清分化培養(yǎng)基中。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及改良的連續(xù)(無限增殖化)細(xì)胞系，特別是從正常人類皮膚組織衍生的角化細(xì)胞和黑素細(xì)胞。本發(fā)明也涉及用于分離、生產(chǎn)和保持所述改良的無限增殖化角化細(xì)胞系和黑素細(xì)胞系的新型無血清培養(yǎng)基。本發(fā)明也涉及在無血清的條件下、不加任何飼養(yǎng)細(xì)胞生產(chǎn)原代角化細(xì)胞和黑素細(xì)胞的方法。 |
| 國(guó)際公布 | WO1997/023602 英 1997.7.3 |
