多肽的酶表面呈現(xiàn)技術(shù)和膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白C端多肽的酶表面呈現(xiàn)
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公開(kāi)(公告)號(hào)
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CN1548540A
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公開(kāi)(公告)日
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2004.11.24
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申請(qǐng)(專利)號(hào)
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CN03113401.7
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申請(qǐng)日期
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2003.05.09
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專利名稱
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多肽的酶表面呈現(xiàn)技術(shù)和膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白C端多肽的酶表面呈現(xiàn)
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主分類號(hào)
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C12N15/55
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分類號(hào)
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C12N15/55;C12N15/62;C12N9/82;C12N15/12;C12P21/02;A61K38/50;A61K39/00;A61P3/06
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分案原申請(qǐng)?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(qǐng)(專利權(quán))人
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中國(guó)藥科大學(xué)
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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劉景晶;祁高富;茅丹;吳潔;曹榮月
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地址
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210009江蘇省南京市童家巷24號(hào)
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頒證日
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國(guó)際申請(qǐng)
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進(jìn)入國(guó)家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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代理人
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國(guó)省代碼
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江蘇;32
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主權(quán)項(xiàng)
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一種將多肽呈現(xiàn)在大腸桿菌L-門(mén)冬酰氨酶表面的方法，其特征在于通過(guò)基因操作將肽段通過(guò)一段間隔肽-----源于破傷風(fēng)毒素的T輔助表位肽段，連接在L-門(mén)冬酰氨酶的C端；形成的融合基因可以表達(dá)產(chǎn)生具有門(mén)冬酰氨酶活性的融合蛋白，多肽被呈現(xiàn)到酶表面，不影響酶自身的折迭。
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摘要
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本發(fā)明提供了一種將多肽呈現(xiàn)在大腸桿菌門(mén)冬酰氨酶表面的方法，它包括步驟：1〕通過(guò)基因操作，將源于破傷風(fēng)毒素的T輔助表位肽段融合到門(mén)冬酰氨酶的C端，形成通用的呈現(xiàn)載體；2〕將待呈現(xiàn)的多肽編碼序列DNA連接在上述載體的C端；3〕生成的重組酶能分泌到周質(zhì)中并保持大部分酶活性，能通過(guò)滲透振擾法快速制備；該表面呈現(xiàn)技術(shù)能快速呈現(xiàn)抗原多肽，用于發(fā)展疫苗和測(cè)定抗體的檢測(cè)試劑。用該呈現(xiàn)技術(shù)將人膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白C端多肽呈現(xiàn)到了酶表面，形成一種新的重組蛋白和相應(yīng)編碼基因，該基因在大腸桿菌中高效表達(dá)，重組蛋白保留了85％的酶活性，該重組蛋白的用途是能誘發(fā)機(jī)體產(chǎn)生抗人膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白特異抗體，阻斷人膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白的功能，使機(jī)體高密度酯蛋白膽固醇含量升高，起到預(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化和促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化消退的作用。
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國(guó)際公布
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評(píng)論加載中...
