公開(kāi)(公告)號(hào)
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CN1566325A
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公開(kāi)(公告)日
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2005.01.19
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申請(qǐng)(專利)號(hào)
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CN03126246.5
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申請(qǐng)日期
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2003.07.09
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專利名稱
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0157:H7出血性大腸桿菌變異株的制取方法
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主分類號(hào)
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C12N1/20
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分類號(hào)
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C12N1/20;A61K39/108;C12Q1/04;//(C12N1/20,C12R1∶19)
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分案原申請(qǐng)?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(qǐng)(專利權(quán))人
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李迅
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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李迅
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地址
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450003河南省鄭州市緯五路東段47號(hào)
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頒證日
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國(guó)際申請(qǐng)
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進(jìn)入國(guó)家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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鄭州天陽(yáng)專利事務(wù)所
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代理人
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聶孟民
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國(guó)省代碼
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河南;41
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主權(quán)項(xiàng)
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一種0157:H7出血性大腸桿菌變異株的制取方法,其特征在于是將0157:H7出血性大腸桿菌增菌于由蛋白粉10克、氯化鈉10克和酵母粉5克加水1000ml制成的LB肉湯中,在37℃培養(yǎng)4-6小時(shí),增殖細(xì)菌濃度為107cfu/ml,然后用該濃度的肉湯含菌液口服接種于動(dòng)物模型,動(dòng)物接種48小時(shí)后發(fā)生腹瀉,取動(dòng)物腹瀉中的糞便加入LB肉湯中,在37℃下增殖6-18小時(shí),糞便加入量為每5ml的LB肉湯中加0.1-2克,增殖后的含菌液劃線接種于細(xì)菌分離平板,在37℃培養(yǎng)18-24小時(shí),挑選菌落,接種克氏雙糖和MIU生化培養(yǎng)管內(nèi),然后作血清凝集試驗(yàn),或用PCR測(cè)定菌株的毒力基因。
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摘要
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本發(fā)明是一種0157:H7出血性大腸桿菌變異株的制取方法,可有效地解決為防治出血性大腸桿菌感染所致嚴(yán)重并發(fā)癥的疫苗問(wèn)題,另為臨床診斷和治療提供了病原和動(dòng)物模型;其實(shí)現(xiàn)的技術(shù)方案是用標(biāo)準(zhǔn)的出血性大腸桿菌增菌于LB肉湯中,生成含菌液,該菌液口服接種于動(dòng)物模型,動(dòng)物腹瀉過(guò)程中,取其糞便再加入LB肉湯中,增殖培養(yǎng),然后將細(xì)菌接種于分離平板上,培養(yǎng)后挑選菌落,接種克氏雙糖和MIU生化管,或用生化儀測(cè)定細(xì)菌生化特征,再作血清凝集診斷;本發(fā)明不但提供了一種出血性大腸桿菌變異株的制備方法,而且確定獲得了出血性大腸桿菌的變異株,同時(shí)也確定了能模擬人感染出血性大腸桿菌后而導(dǎo)致嚴(yán)重疾病的動(dòng)物模型,它將有利疫苗的制備和臨床治療問(wèn)題,是醫(yī)學(xué)上的一大發(fā)明,其推廣應(yīng)用,必造福于人類。
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國(guó)際公布
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