公開(公告)號
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CN1193092C
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公開(公告)日
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2005.03.16
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申請(專利)號
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CN03116090.5
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申請日期
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2003.03.28
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專利名稱
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骨髓間充質(zhì)干細胞分離和體外擴增培養(yǎng)方法
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主分類號
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C12N5/08
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分類號
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C12N5/08
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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浙江大學(xué);杭州大力神醫(yī)療器械有限公司
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發(fā)明(設(shè)計)人
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王金福
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地址
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310027 浙江省杭州市西湖區(qū)浙大路38號
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頒證日
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國際申請
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進入國家日期
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專利代理機構(gòu)
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杭州求是專利事務(wù)所有限公司
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代理人
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趙杭麗;張法高
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國省代碼
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浙江;33
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主權(quán)項
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一種骨髓間充質(zhì)干細胞分離和體外擴增培養(yǎng)方法,從骨髓中分離單核細胞,先進行細胞原代貼壁培養(yǎng),再依據(jù)骨髓間充質(zhì)干細胞表面標記抗原對貼壁細胞進行免疫抗體分選,其特征是:采用正、負向免疫分選結(jié)合的方法進行免疫抗體分選,純化骨髓間充質(zhì)干細胞,獲得CD14-CD105+細胞,在體外培養(yǎng)體系中繼代擴增培養(yǎng),進行正、負向免疫分選純化骨髓間充質(zhì)干細胞的步驟為:第一步進行陰性免疫篩選,采用CD14標記磁珠分選,獲得CD14-細胞,第二步進行陽性免疫篩選,采用CD105標記磁珠分選,獲得CD14-CD105+細胞。
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摘要
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本發(fā)明提供了一種骨髓間充質(zhì)干細胞分離和體外擴增培養(yǎng)方法。為了有效提高骨髓間充質(zhì)干細胞的體外純化率和擴增能力,在分離骨髓單核細胞的基礎(chǔ)上,采用貼壁培養(yǎng)原代細胞后,再采用正、負向免疫分選結(jié)合的方法進行免疫抗體分選,純化骨髓間充質(zhì)干細胞,并在隨后的純化細胞擴增培養(yǎng)中,建立含有人參皂甙多糖的骨髓間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)體系,可提高骨髓間充質(zhì)干細胞的體外擴增和繼代培養(yǎng)能力,達到建立人骨髓間充質(zhì)干細胞株系的目的。
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國際公布
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