| 公開(公告)號(hào) | CN1196714C |
| 公開(公告)日 | 2005.04.13 |
| 申請(qǐng)(專利)號(hào) | CN99809281.9 |
| 申請(qǐng)日期 | 1999.06.09 |
| 專利名稱 | 生產(chǎn)用于靜脈給藥的免疫球蛋白和其他免疫球蛋白產(chǎn)品的方法 |
| 主分類號(hào) | C07K16/06 |
| 分類號(hào) | C07K16/06 |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | 1998.6.9 EP 98201909.3; 1998.9.28 US 60/102,055 |
| 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 斯塔滕斯血清研究所 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 因加·勞森;伯厄·泰斯納 |
| 地址 | 丹麥哥本哈根 |
| 頒證日 | |
| 國際申請(qǐng) | PCT/DK1999/000312 1999.6.9 |
| 進(jìn)入國家日期 | 2001.02.02 |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 永新專利商標(biāo)代理有限公司 |
| 代理人 | 林曉紅 |
| 國省代碼 | 丹麥;DK |
| 主權(quán)項(xiàng) | 從含免疫球蛋白的粗制血漿蛋白組分中純化免疫球蛋白G的方法，包括以下步驟：(a)制備含免疫球蛋白的粗制血漿蛋白組分的水相懸浮液；(b)在上述步驟(a)的懸浮液中加入足夠量的一種可溶于水的不使蛋白變性的沉淀劑，沉淀大部分非免疫球蛋白G的蛋白、免疫球蛋白聚集體和包括潛在感染性顆粒在內(nèi)的顆粒，而不造成免疫球蛋白G單體的沉淀，這樣形成了一種固體沉淀和液體上清的混合物；(c)從步驟(b)的混合物中回收澄清的含免疫球蛋白G的上清；(d)將步驟(c)澄清的含免疫球蛋白G的上清加至陰離子交換樹脂，再加至陽離子交換樹脂，其中陰離子交換樹脂和陽離子交換樹脂串聯(lián)連接，并且用于陰離子交換層析和陽離子交換層析的緩沖液相同，緩沖液的pH值也相同，均低于6.0；(e)用pH和離子強(qiáng)度足以去除樹脂中的蛋白雜質(zhì)，而不造成免疫球蛋白G洗脫的緩沖液洗去蛋白雜質(zhì)和蛋白沉淀劑；(f)用pH和離子強(qiáng)度足以有效洗脫免疫球蛋白G的非變性緩沖液洗脫免疫球蛋白G，從而回收含免疫球蛋白G的洗脫液；(g)將步驟(f)含免疫球蛋白G的洗脫液進(jìn)行透濾和超濾以濃縮和/或透析洗脫液；(h)在步驟(g)已透濾和超濾的含免疫球蛋白G的組分中加入病毒致死劑量的病毒滅活劑形成無病毒的含免疫球蛋白G的溶液；(i)將步驟(h)含免疫球蛋白G的溶液加至陰離子交換樹脂純化再接著加至陽離子交換樹脂；(j)用pH和離子強(qiáng)度足以從樹脂中有效洗去蛋白雜質(zhì)和病毒滅活劑而不造成免疫球蛋白G的洗脫的緩沖液洗步驟(i)的陽離子交換樹脂；(k)用pH和離子強(qiáng)度足以有效洗脫免疫球蛋白G的非變性緩沖液從步驟(j)的陽離子交換樹脂洗脫免疫球蛋白G，由此回收含免疫球蛋白G的洗脫液；以及(l)透濾和超濾步驟(k)的含免疫球蛋白G的洗脫液以降低離子強(qiáng)度并濃縮溶液的免疫球蛋白G，加入糖類物質(zhì)調(diào)節(jié)重量摩爾滲透濃度。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及一種從含免疫球蛋白的粗制血漿蛋白組分中純化免疫球蛋白G的方法。所述的方法包括一系列步驟，其中優(yōu)選依次結(jié)合使用陰離子交換柱和陽離子交換柱。在整個(gè)純化方法中優(yōu)選使用一種pH5.0-6.0摩爾濃度約5-25mM的醋酸鹽緩沖液。本發(fā)明進(jìn)一步包括通過本發(fā)明方法獲得的免疫球蛋白產(chǎn)品。本發(fā)明還涉及一種純度超過98％、IgG單體和二聚體含量大于98.5％、IgA含量少于4mg/L并含有少于0.5％的聚合物和聚集體的免疫球蛋白產(chǎn)品。所述產(chǎn)品不包含作為穩(wěn)定劑的去污劑，PEG或白蛋白。所述產(chǎn)品穩(wěn)定、無病毒、呈液體，可直接用于靜脈給藥。 |
| 國際公布 | WO1999/064462 英 1999.12.16 |
