| 公開(公告)號(hào) | CN1609221A |
| 公開(公告)日 | 2005.04.27 |
| 申請(qǐng)(專利)號(hào) | CN200310108025.5 |
| 申請(qǐng)日期 | 2003.10.20 |
| 專利名稱 | 人源甲硫氨酰氨肽酶1的表達(dá)方法及它在尋找抗腫瘤藥物中應(yīng)用 |
| 主分類號(hào) | C12N15/52 |
| 分類號(hào) | C12N15/52;C12N9/48;C12Q1/25 |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 中國(guó)科學(xué)院上海藥物研究所 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 李佳;南發(fā)俊;葉其壯;李靜雅;羅群力;陳玲玲;崔永梅 |
| 地址 | 201203上海市浦東張江高科技園區(qū)祖沖之路555號(hào) |
| 頒證日 | |
| 國(guó)際申請(qǐng) | |
| 進(jìn)入國(guó)家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 上海開祺專利代理有限公司 |
| 代理人 | 費(fèi)開逵;季良赳 |
| 國(guó)省代碼 | 上海;31 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種人源I型甲硫氨酰肽酶(HsMetAP1)及它的缺失突變(HsMetAP1Δ1-66，HsMetAP1Δ1-135)的表達(dá)方法，包括如下步驟：(1)設(shè)計(jì)不同的正、反向引物；(2)以人源膀胱細(xì)胞ECV304的總RNA為模板用RT-PCR方法得該細(xì)胞的cDNA，利用上述設(shè)計(jì)的引物和得到的cDNA用PCR方法得到HsMetAP1的編碼序列；(3)用內(nèi)切酶EcoRI和SalI雙酶切質(zhì)粒載體pGEX-KG用T4連接酶連接、純化得重組質(zhì)粒pGEX-KG/HsMetAP1；(4)將上述重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化入大腸桿菌表達(dá)，經(jīng)提取、純化得活性蛋白HsMetAP1或HsMetAP1Δ1-66，HsMetAP1Δ1-135。 |
| 摘要 | 本發(fā)明公開了一種人源I型甲硫氨酰氨肽酶HsMetAP1在原核生物大腸桿菌的表達(dá)系統(tǒng)，并純化得到活性蛋白并找到了其活性關(guān)鍵結(jié)構(gòu)的要求；本發(fā)明公開了建立HsMetAP1的高通量篩選模型，應(yīng)用該模型篩選得到活性化合物，找到了活性化合物具有抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的活性，以及人源I型甲硫氨酰氨肽酶與腫瘤之間的關(guān)系。 |
| 國(guó)際公布 |
