| 公開(公告)號 | CN1206243C |
| 公開(公告)日 | 2005.06.15 |
| 申請(專利)號 | CN02103667.5 |
| 申請日期 | 2002.02.08 |
| 專利名稱 | 豬傳染性胃腸炎病毒卵黃抗體和抗原及其制備 |
| 主分類號 | C07K16/02 |
| 分類號 | C07K16/02;C07K14/17 |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 北京市農(nóng)林科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | 王金洛;徐福州;楊兵;宋維平;;賴平安;秦澤云 |
| 地址 | 100089 北京市海淀區(qū)西郊板井 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進入國家日期 | |
| 專利代理機構(gòu) | 北京海虹嘉誠知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 |
| 代理人 | 張濤;陸濱芊 |
| 國省代碼 | 北京;11 |
| 主權(quán)項 | 一種豬傳染性胃腸炎病毒(TGEV)卵黃抗體，其特征是該抗體是將分離自中國北京地區(qū)的TGEV病毒分離株作為人工抗原用于免疫非免疫產(chǎn)蛋雞，收集該被免疫的雞所產(chǎn)雞蛋，從其蛋黃中提取的豬傳染性胃腸炎病毒卵黃抗體；所述豬傳染性胃腸炎病毒卵黃抗體的制備方法，包括以下步驟：1)TGEV抗原制備給仔豬口服所述TGEV病毒，攻毒后48小時出現(xiàn)重度腹瀉時捕殺，取出小腸組織剪碎研磨，加0.01MPBS稀釋，反復(fù)凍融，離心得到純化病毒粒子；將該病毒粒子在豬睪丸(ST)細胞上增殖，收獲細胞懸液，反復(fù)凍融三次后離心取上清液繼續(xù)在細胞上盲傳至第三代出現(xiàn)典型細胞病變；感染細胞上清液經(jīng)凍融后離心，濃縮后用作抗原；上述濃縮抗原液，與弗氏完全佐劑乳化后作為首免用免疫原，與弗氏不完全佐劑乳化后作為二免、三免及四免用免疫原；2)免疫用上述制備的免疫原對非免疫產(chǎn)蛋雞進行免疫，程序為：首免前5日注射“吸附百日咳菌苗、白喉、破傷風(fēng)類毒素”進行免疫刺激，首免時注射免疫原1ml；2周后進行二免，注射免疫原1ml；再隔2周進行三免，注射免疫原2ml；再隔4周后進行第四次免疫，注射免疫原4ml；3)卵黃抗體分離提純首免后6-14周收集所產(chǎn)雞蛋，分離出卵黃，與等量PBS混合后勻漿，測定抗體效價，然后用聚乙二醇(PEG-6000)沉淀法提純；所述用聚乙二醇(PEG-6000)沉淀法提純的程序為：依次分別用3.5％PEG-6000、8.5％PEG-6000、12％PEG-6000對卵黃抗體沉淀3次，最后用預(yù)冷的50％乙醇進一步沉淀，得到卵黃抗體提純物。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及豬傳染性胃腸炎病毒卵黃抗體和抗原及其制備方法。本發(fā)明將豬傳染性胃腸炎病毒在豬睪丸細胞上增殖后作為免疫原，用于免疫非免疫蛋雞，在收集卵黃并提純的基礎(chǔ)上獲取了可用于治療和預(yù)防豬傳染性胃腸炎病毒的卵黃抗體。使用本發(fā)明的卵黃抗體治療試驗攻毒豬，試驗組臨床癥狀比對照組明顯減輕，且試驗組的死亡率顯著低于對照組。將本發(fā)明提供的卵黃抗體在豬傳染性胃腸炎高發(fā)病率的豬場實地應(yīng)用，也產(chǎn)生了明顯的預(yù)防和治療作用。 |
| 國際公布 |
