一種以短桿菌生物合成胞外型膽固醇氧化酶及其轉(zhuǎn)化產(chǎn)物膽甾-4-烯-3-酮的方法
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公開(公告)號
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CN1208454C
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公開(公告)日
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2005.06.29
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申請(專利)號
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CN01113673.1
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申請日期
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2001.06.05
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專利名稱
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一種以短桿菌生物合成胞外型膽固醇氧化酶及其轉(zhuǎn)化產(chǎn)物膽甾-4-烯-3-酮的方法
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主分類號
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C12N9/02
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分類號
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C12N9/02;C12P33/00
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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江南大學(xué)
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發(fā)明(設(shè)計)人
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王武;季文明;陳毅力;呂陳峰;;陳亮;韓振芳
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地址
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214036 江蘇省無錫市惠河路170號
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頒證日
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國際申請
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進入國家日期
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專利代理機構(gòu)
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無錫市大為專利事務(wù)所
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代理人
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時旭丹
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國省代碼
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江蘇;32
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主權(quán)項
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一種膽固醇氧化酶，其特征是以短桿菌(Brevibacteriumsp.)突變株DGCDC-82保藏編號CCTCCNO.M201008為產(chǎn)酶菌株，酶蛋白分子量為5萬道爾頓，全酶含有輔酶FAD，酶活性中心部位有半胱氨酸殘基存在。
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摘要
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一種以短桿菌生物合成胞外型膽固醇氧化酶及其轉(zhuǎn)化產(chǎn)物膽甾-4-烯-3-酮的方法，屬微生物酶工程技術(shù)領(lǐng)域。以高產(chǎn)菌DGCDC-82在優(yōu)化條件下發(fā)酵，產(chǎn)酶可達700-1000U/L，純化后比酶活達30U/mg以上。所得酶蛋白分子量為5萬道爾頓，全酶含有輔酶FAD，酶活性中心有半胱氨酸存在。在水相/有機相雙相體系中該酶可將膽固醇專一地氧化為膽甾-4-烯-3-酮，轉(zhuǎn)化率達92％，轉(zhuǎn)化反應(yīng)條件溫和，快速。試驗表明膽甾烯酮對降低小鼠、家兔的膽固醇、血脂和低密度脂蛋白有明顯效果，可應(yīng)用于開發(fā)醫(yī)用酶法測血液膽固醇的試劑盒，低膽固醇且富含膽甾-4-烯-3-酮的保健型食品，醫(yī)用膽甾烯酮制劑等產(chǎn)品，以填補國內(nèi)空白。
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國際公布
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