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一種以短桿菌生物合成胞外型膽固醇氧化酶及其轉(zhuǎn)化產(chǎn)物膽甾-4-烯-3-酮的方法

公開(公告)號 CN1208454C  
公開(公告)日 2005.06.29  
申請(專利)號 CN01113673.1  
申請日期 2001.06.05  
專利名稱 一種以短桿菌生物合成胞外型膽固醇化酶及其轉(zhuǎn)化產(chǎn)物膽甾-4-烯-3-酮的方法  
主分類號 C12N9/02  
分類號 C12N9/02;C12P33/00  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 江南大學(xué)  
發(fā)明(設(shè)計)人 王武;季文明;陳毅力;呂陳峰;;陳亮;韓振芳  
地址 214036 江蘇省無錫市惠河路170號  
頒證日  
國際申請  
進入國家日期  
專利代理機構(gòu) 無錫市大為專利事務(wù)所  
代理人 時旭丹  
國省代碼 江蘇;32  
主權(quán)項 一種膽固醇氧化酶,其特征是以短桿菌(Brevibacteriumsp.)突變株DGCDC-82保藏編號CCTCCNO.M201008為產(chǎn)酶菌株,酶蛋白分子量為5萬道爾頓,全酶含有輔酶FAD,酶活性中心部位有半胱酸殘基存在。  
摘要 一種以短桿菌生物合成胞外型膽固醇氧化酶及其轉(zhuǎn)化產(chǎn)物膽甾-4-烯-3-酮的方法,屬微生物酶工程技術(shù)領(lǐng)域。以高產(chǎn)菌DGCDC-82在優(yōu)化條件下發(fā)酵,產(chǎn)酶可達700-1000U/L,純化后比酶活達30U/mg以上。所得酶蛋白分子量為5萬道爾頓,全酶含有輔酶FAD,酶活性中心有半胱氨酸存在。在水相/有機相雙相體系中該酶可將膽固醇專一地氧化為膽甾-4-烯-3-酮,轉(zhuǎn)化率達92%,轉(zhuǎn)化反應(yīng)條件溫和,快速。試驗表明膽甾烯酮對降低小、家的膽固醇、血脂和低密度脂蛋白有明顯效果,可應(yīng)用于開發(fā)醫(yī)用酶法測血液膽固醇的試劑盒,低膽固醇且富含膽甾-4-烯-3-酮的保健型食品,醫(yī)用膽甾烯酮制劑等產(chǎn)品,以填補國內(nèi)空白。  
國際公布  
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