| 公開(公告)號 | CN1212400C |
| 公開(公告)日 | 2005.07.27 |
| 申請(專利)號 | CN01145166.1 |
| 申請日期 | 2001.12.31 |
| 專利名稱 | 用于生產(chǎn)口蹄疫疫苗的油菜葉綠體轉(zhuǎn)基因植物的獲得方法 |
| 主分類號 | C12N15/33 |
| 分類號 | C12N15/33;C12N15/82;C12N15/90;A01H1/00;A61K39/12;A61P31/12 |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 甘肅亞盛集團;中國科學院遺傳研究所 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | 周長生;陳正華;杜若甫;胡贊民;;石銳 |
| 地址 | 730030 甘肅省蘭州市張掖路219號基隆大廈21層 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進入國家日期 | |
| 專利代理機構(gòu) | 中科專利商標代理有限責任公司 |
| 代理人 | 李悅 |
| 國省代碼 | 甘肅;62 |
| 主權(quán)項 | 一種用于生產(chǎn)O型口蹄疫多肽疫苗的油菜葉綠體轉(zhuǎn)基因植物的獲得方法，包括以下步驟：(1)構(gòu)建用于向油菜葉綠體中定點轉(zhuǎn)化外源基因的油菜葉綠體相關(guān)DNA序列；(2)合成編碼O型口蹄疫多肽疫苗的基因序列，使該序列與報告基因或具有強免疫源性蛋白的基因串聯(lián)得到融合的O型口蹄疫多肽疫苗基因，所述編碼O型口蹄疫多肽疫苗的基因序列由SEQIDNO：3或SEQIDNO：4所示；(3)將步驟(1)構(gòu)建出來的DNA序列與步驟(2)合成的融合的O型口蹄疫多肽疫苗基因重組，使融合的疫苗基因序列位于油菜葉綠體相關(guān)DNA序列的中間；(4)將步驟(3)中重組得到的DNA片段插入到克隆載體的多克隆位點上，作為O型口蹄疫多肽疫苗基因油菜葉綠體定點轉(zhuǎn)化載體；和(5)用步驟(4)得到的轉(zhuǎn)化載體轉(zhuǎn)化油菜，獲得葉綠體表達O型口蹄疫多肽疫苗的轉(zhuǎn)基因植物。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及一種用于生產(chǎn)口蹄疫多肽疫苗的油菜葉綠體轉(zhuǎn)基因植物的獲得方法。方法包括：克隆油菜葉綠體基因組同源重組片段SEQ IDNO：1所示序列，以及SEQ ID：2所示序列，并用這兩個DNA片段構(gòu)建油菜葉綠體定點轉(zhuǎn)化載體，在載體上這兩個片段之間，插有口蹄疫多肽疫苗基因(即SEQ ID NO：3及SEQ ID NO：4所示序列)與綠色熒光蛋白或其它報告基因串聯(lián)而得的融合疫苗基因。并將融合基因插入一種克隆載體中。通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)，使該基因的同源重組序列與油菜葉綠體發(fā)生定點整合。再經(jīng)對油菜細胞的篩選與植株誘導(dǎo)與培育，最終獲得表達口蹄疫多肽疫苗的油菜葉綠體轉(zhuǎn)基因植物。 |
| 國際公布 |
