| 公開(公告)號(hào) | CN1227357C |
| 公開(公告)日 | 2005.11.16 |
| 申請(qǐng)(專利)號(hào) | CN00807534.4 |
| 申請(qǐng)日期 | 2000.03.14 |
| 專利名稱 | 用于擴(kuò)增核酸序列的方法 |
| 主分類號(hào) | C12N15/10 |
| 分類號(hào) | C12N15/10;C12Q1/68 |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | 1999.3.19 JP 76966/99;1999.12.27 JP 370035/99 |
| 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 寶生物工程株式會(huì)社 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 向井博之;山本純子;武田理;三宅一惠;上森隆司;佐藤好美;森山麻里子;椹木治久;萩屋道雄;淺田起代蔵;加藤郁之進(jìn) |
| 地址 | 日本大津市 |
| 頒證日 | |
| 國際申請(qǐng) | 2000-03-14 PCT/JP2000/001534 |
| 進(jìn)入國家日期 | 2001.11.13 |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 中國專利代理(香港)有限公司 |
| 代理人 | 姜建成 |
| 國省代碼 | 日本;JP |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種擴(kuò)增核苷酸序列或大量生產(chǎn)核酸的方法，其特征在于所述方法包括：(a)通過混合模板核酸、三磷酸脫氧核糖核苷酸、具有鏈置換活性的DNA聚合酶、至少一種引物和切割由引物產(chǎn)生的延伸鏈的內(nèi)切核酸酶制備反應(yīng)混合物，其中所述引物為與所述模板核酸的核苷酸序列基本互補(bǔ)而且包含脫氧核糖核苷酸和核糖核苷酸的嵌合寡核苷酸引物，所述核糖核苷酸位于所述引物的3’-末端或3’-末端側(cè)上；以及(b)在所述引物可特異性地退火至模板核酸上、發(fā)生延伸鏈合成反應(yīng)和所述DNA聚合酶的鏈置換反應(yīng)以及內(nèi)切核酸酶切割延伸鏈的反應(yīng)的條件下，溫育反應(yīng)混合物足夠時(shí)間，以產(chǎn)生反應(yīng)產(chǎn)物。 |
| 摘要 | 一種簡便有效擴(kuò)增核酸序列的方法，其特征在于在存在嵌合寡核苷酸引物的情況下完成DNA合成反應(yīng)；一種提供大量DNA擴(kuò)增片段的方法；一種通過聯(lián)用上述方法和另一種核酸序列擴(kuò)增方法而擴(kuò)增核酸序列的有效方法；一種檢測核酸序列的方法，它用于檢測或定量微生物，例如病毒、細(xì)菌、真菌或酵母；以及一種檢測上述方法原位獲得的DNA擴(kuò)增片段的方法。 |
| 國際公布 | 2000-09-28 WO2000/056877 日 |
