| 公開(公告)號 | CN1699421A |
| 公開(公告)日 | 2005.11.23 |
| 申請(專利)號 | CN200510026584.0 |
| 申請日期 | 2005.06.09 |
| 專利名稱 | SARS病毒抗原S6-1的高特異性抗體的快速制備方法 |
| 主分類號 | C07K16/08 |
| 分類號 | C07K16/08 |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權 | |
| 申請(專利權)人 | 上海大學 |
| 發(fā)明(設計)人 | 許政暟;宋任濤;許寅琦 |
| 地址 | 200444上海市寶山區(qū)上大路99號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進入國家日期 | |
| 專利代理機構 | 上海上大專利事務所 |
| 代理人 | 何文欣 |
| 國省代碼 | 上海;31 |
| 主權項 | 一種SARS病毒抗原S6-1的抗體的快速制備方法，其特征在于該方法包括以下步驟：A.多克隆抗體的制備：a.融合SARS病毒抗原S6-1的TMV重組病毒的構建；b.抗原的制備：采用TMV-S6-1重組病毒的融合S6-1的CP制備抗原TMVCP-S6-1；c.將抗原TMVCP-S6-1免疫家兔，免疫后，抽取兔抗血清備用：B.通過交叉吸附實驗獲得高特異性抗體，具體步驟如下：a.制備交叉吸附需要的蛋白丙酮粉，制備蛋白丙酮粉的蛋白來源有兩個：煙草總蛋白和野生型煙草花葉病毒外殼蛋白，分別得到煙草蛋白丙酮粉和野生型煙草花葉病毒外殼蛋蛋白丙酮粉；b.蛋白丙酮粉吸附兔抗血清，具體步驟如下：(1)取步驟A中c所得到的兔抗血清置入eppendorf管中，加入煙草蛋白丙酮粉均勻混合，煙草蛋白丙酮粉與兔抗血清的重量體積比為1∶50-1∶25；然后在冰上輕彈30min-45min，靜置于冰箱內(nèi)過夜；之后，于4℃下離心分離，將上清移至新的eppendorf管中，得到煙草蛋白丙酮粉處理后的抗體X；(2)取經(jīng)過上述步驟(1)煙草蛋白丙酮粉處理后的抗體X置入eppendorf管中，加入野生型煙草花葉病毒外殼蛋蛋白丙酮粉均勻混合，野生型煙草花葉病毒外殼蛋蛋白丙酮粉與抗體的重量體積比為1∶50-1∶25；在冰上輕彈30min-45min，靜置于冰箱內(nèi)過夜；之后，于4℃下離心分離，將上清移至新的eppendorf管中，得到抗體Y；c.ProteinA親和層析柱純化抗體Y，得到抗體Anti-S6-1。 |
| 摘要 | 提供一種高特異性抗體快速制備的方法，包括融合外源序列的TMV CP-S6-1免疫動物得到多克隆抗體，使用煙草總蛋白和煙草花葉病毒外殼蛋白的蛋白丙酮粉多克隆抗體通過交叉吸附實驗，并以蛋白A親和層析柱為分離方式，然后做抗體的效果的免疫鑒定，屬分子生物學及抗體制備技術領域。本發(fā)明的方法操作簡單，經(jīng)濟快捷，重復性好，是一種準確并且易于普及推廣的病毒抗原抗體的快速制備方法。 |
| 國際公布 |
