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重組全長人肝再生增強(qiáng)因子的生產(chǎn)方法

公開(公告)號(hào) CN1233839C  
公開(公告)日 2005.12.28  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN02125768.X  
申請(qǐng)日期 2002.08.16  
專利名稱 重組全長人肝再生增強(qiáng)因子的生產(chǎn)方法  
主分類號(hào) C12P21/02  
分類號(hào) C12P21/02;A61K38/18;A61P1/16;//C12P21/02,C12R1∶01  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 中國人民解放軍傳染病研究所;上海友恒生物科技有限公司  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 成 軍;王 剛;夏小兵;洪 源;劉 妍;鐘彥偉;王 琳;董 菁  
地址 100039北京市豐臺(tái)區(qū)豐臺(tái)路26號(hào)  
頒證日  
國際申請(qǐng)  
進(jìn)入國家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 北京恒信悅達(dá)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司  
代理人 王衛(wèi)東  
國省代碼 北京;11  
主權(quán)項(xiàng) 一種重組全長人肝再生增強(qiáng)因子的生產(chǎn)方法,該方法包括以下步驟:A、工程菌種的活化;B、發(fā)酵,其中發(fā)酵為低密度發(fā)酵,其誘導(dǎo)表達(dá)時(shí)間為OD600=0.3-0.4;C、裂菌;D、包涵體洗滌;E、包涵體裂解;F、包涵體復(fù)性;和G、純化,其中純化采用陽離子交換層析進(jìn)行。  
摘要 本發(fā)明為重組全長人肝再生增強(qiáng)因子的生產(chǎn)方法及其治療嚴(yán)重肝病的用途,屬于生物產(chǎn)品的生產(chǎn)方法及用途領(lǐng)域。在獲取全長人肝再生增強(qiáng)因子基因序列并成功構(gòu)建高效表達(dá)菌株的基礎(chǔ)上,建立了重組全長人肝再生增強(qiáng)因子原核表達(dá)、包涵體分離裂解、蛋白質(zhì)純化復(fù)性的工藝,最終獲得重組全長人肝再生增強(qiáng)因子純品。后者能夠在體外促進(jìn)肝細(xì)胞系HepG2的DNA合成,在體內(nèi)促進(jìn)肝部分切除術(shù)后大肝臟的再生,促進(jìn)CCl4中毒后大鼠肝細(xì)胞DNA合成與修復(fù),提高CCl4中毒后大鼠存活率,表明重組全長人肝再生增強(qiáng)因子具有治療嚴(yán)重肝病的用途。  
國際公布  
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