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公開(kāi)(公告)號(hào)
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CN1238506C
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公開(kāi)(公告)日
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2006.01.25
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申請(qǐng)(專(zhuān)利)號(hào)
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CN200310106226.1
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申請(qǐng)日期
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2003.11.07
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專(zhuān)利名稱(chēng)
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用作畜禽疫苗佐劑的CpG DNA基因工程重組體
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主分類(lèi)號(hào)
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C12N15/11(2006.01)I
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分類(lèi)號(hào)
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C12N15/11(2006.01)I;C12P19/34(2006.01)I;A61K39/39(2006.01)I
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分案原申請(qǐng)?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人
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深圳市未來(lái)海洋科技發(fā)展有限公司
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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李光富;朱鴻飛
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地址
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210096廣東省深圳市中心區(qū)福中一路江蘇大廈30樓45號(hào)信箱
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頒證日
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國(guó)際申請(qǐng)
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進(jìn)入國(guó)家日期
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專(zhuān)利代理機(jī)構(gòu)
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南京經(jīng)緯專(zhuān)利商標(biāo)代理有限公司
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代理人
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王之梓
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國(guó)省代碼
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廣東;44
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主權(quán)項(xiàng)
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一種能提高畜禽疫苗效價(jià)的用作畜禽疫苗佐劑的CpGDNA的基因工程重組體，其特征在于：該基因工程重組體是按如下步驟制備的，按照5’-GGTGCATCGATGCAGGGGGG-3’、5’-GGTGCGTCGATGCAGGGGGG-3’及5’-TCGTCGTTTTGTCGTTTTGTCGTT-3’串聯(lián)而成的目的DNA序列，合成其正鏈和負(fù)鏈，在合成的寡核苷酸末端加上能與線形載體末端相匹配的堿基序列，然后將如此得到的寡核苷酸片段、退火緩沖液及無(wú)菌重蒸水混合后，于90℃～100℃水浴中孵浴3分鐘以上，自然冷卻至室溫，將由此形成的一個(gè)或多個(gè)這樣的雙鏈DNA片段插入線性載體的相應(yīng)的酶切位點(diǎn)，最后，將其轉(zhuǎn)化感受態(tài)大腸桿菌而得到的基因工程重組體。
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摘要
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本發(fā)明公開(kāi)了一種能促進(jìn)畜禽疫苗效價(jià)的用作畜禽疫苗佐劑的CpG DNA的基因工程重組體，該基因工程重組體是根據(jù)由序列為：5’----GGTGCATCGATGCAGGGGGG--3’、5’----GGTGCGTCGATGCAGGGGGG--3’及5’---TCGTCGTTTTGTCGTTTTGTCGTT--3’串聯(lián)而成的D19D282006目的片段DNA的序列，合成其寡核苷酸正鏈和負(fù)鏈合成其寡核苷酸正鏈和負(fù)鏈，在合成的寡核苷酸末端加上能與線形載體末端相匹配的堿基序列，然后將此寡核苷酸片段、退火緩沖液、及無(wú)菌重蒸水混合后，于90℃～100℃水浴中孵浴3分鐘以上，自然冷卻至室溫，形成含D19D282006序列的DNA片段，此后將此DNA片段插入線性載體的相應(yīng)的酶切位點(diǎn)，最后，將其轉(zhuǎn)化感受態(tài)大腸桿菌而得到的基因工程重組體。本發(fā)明能提高CpG佐劑的效能，生產(chǎn)工藝簡(jiǎn)單，成本低廉，適合于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)。極大地降低了CpG ODN的生產(chǎn)成本。
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國(guó)際公布
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