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選定生物體的人工啟動子文庫和得自這種文庫的啟動子

公開(公告)號 CN1243827C  
公開(公告)日 2006.03.01  
申請(專利)號 CN97198703.3  
申請日期 1997.08.25  
專利名稱 選定生物體的人工啟動子文庫和得自這種文庫的啟動子  
主分類號 C12N15/11(2006.01)I  
分類號 C12N15/11(2006.01)I;C12N15/63(2006.01)N  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán) 1996.8.23 DK 0886/96  
申請(專利權(quán))人 彼得·魯戴爾·簡森  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 彼得·魯戴爾·簡森;卡林·哈默  
地址 丹麥根措夫特  
頒證日  
國際申請 1997-08-25 PCT/DK1997/000342  
進(jìn)入國家日期 1999.04.09  
專利代理機(jī)構(gòu) 中國國際貿(mào)易促進(jìn)委員會專利商標(biāo)事務(wù)所  
代理人 黃革生  
國省代碼 丹麥;DK  
主權(quán)項(xiàng) 一種啟動子文庫,所述文庫包含一套各自不同的啟動子序列,對待表達(dá)基因的啟動子強(qiáng)度而言,該文庫覆蓋一個啟動子活性范圍;該套各自不同的啟動子序列包含雙鏈DNA序列,其有義鏈含有在所述生物體中鑒定出來的啟動子序列的至少兩個共有序列,在文庫內(nèi)的所有啟動子序列中所述共有序列各自至少一半保持不變,并且,相對于所述已鑒定出的啟動子的相應(yīng)間隔區(qū)序列,在所述共有序列之間或至少一個所述共有序列側(cè)翼的核苷酸間隔區(qū)序列的至少一部分已有所改變而包含隨機(jī)選自核苷堿基A、T、C和G的核苷酸;在所述基因的啟動子活性方面,該啟動子文庫以小步幅方式跨越了一個有用范圍,每一步改變活性25-400%。  
摘要 選定生物體或生物體組的人工啟動子文庫被構(gòu)建為雙鏈DNA片段的混合物,所述雙鏈DNA片段的有義鏈含有得自所述生物體或生物體組之有效啟動子的至少兩個共有序列或它們的包含各自至少一半的部分,以及長度可變的周圍或中間核苷酸序列(間隔區(qū)),所述間隔區(qū)序列中至少7個核苷酸隨機(jī)選自核苷堿基A,T,C和G。雙鏈DNA片段的有義鏈也包含將特定的調(diào)節(jié)特征,如由生長條件的變化引起的激活作用,賦予文庫內(nèi)啟動子的調(diào)節(jié)DNA序列。另外,它們還可能具有添加于其一端或兩端的包含一個或多個限制性內(nèi)切核酸酶識別位點(diǎn)的序列。選定生物體或生物體組可選自原核生物和真核生物;在原核生物中,保留的共有序列最經(jīng)常地含有-35信號(-35至-30):TTGACA和-10信號(-12至-7):TATAAT,或者它們的包含各自至少3個保守核苷酸的部分,而在真核生物中,所述共有序列應(yīng)含有TATA盒和至少一個上游激活序列(UAS)。這種人工啟動子文庫可用于例如在多種選定生物體中使特定基因的表達(dá)最優(yōu)化。  
國際公布 1998-02-26 WO1998/007846 英  
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