公開(公告)號
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CN1256986C
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公開(公告)日
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2006.05.24
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申請(專利)號
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CN94107587.7
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申請日期
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1994.06.02
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專利名稱
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蛋白質(zhì)的生產(chǎn)和蛋白質(zhì)的輸送
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主分類號
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A61K48/00(2006.01)I
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分類號
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A61K48/00(2006.01)I
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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1993.12.2 US PCT/US93/11704;1994.5.13 US 08/243,391
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申請(專利權(quán))人
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轉(zhuǎn)移染色體治療公司
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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道格拉斯·A·特科;邁克爾·W·哈特林;理查德·F·塞爾登
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地址
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美國馬薩諸塞州
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頒證日
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國際申請
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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永新專利商標(biāo)代理有限公司
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代理人
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程 偉
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國省代碼
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美國;US
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主權(quán)項(xiàng)
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一種DNA構(gòu)建體,其在細(xì)胞染色體DNA內(nèi)DNA構(gòu)建體與靶位點(diǎn)同源重組時,改變了細(xì)胞中靶基因的表達(dá),靶位點(diǎn)在靶基因的轉(zhuǎn)錄位點(diǎn)的上游,DNA構(gòu)建體包括:(a)與靶位點(diǎn)同源的導(dǎo)向序列;(b)外源調(diào)節(jié)序列;(c)外顯子;(d)可擴(kuò)增的標(biāo)記基因;(e)在外顯子3’末端的未配對的剪接供體位點(diǎn);其中,導(dǎo)向序列與靶基因同源重組后,細(xì)胞的染色體DNA除了靶基因的所有內(nèi)源外顯子外還包括構(gòu)建體衍生的外顯子。
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摘要
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本發(fā)明涉及含有下述成分的構(gòu)建體:a)擊靶序列;b)調(diào)節(jié)序列;c)外顯子和d)未配對的拼接-供體位點(diǎn)。本發(fā)明還涉及體外或體內(nèi)生產(chǎn)蛋白質(zhì)的方法,該方法包括在細(xì)胞中同源重組上述構(gòu)建體。然后在充許轉(zhuǎn)錄、轉(zhuǎn)譯的條件下維持該同源重組體細(xì)胞,而導(dǎo)致蛋白質(zhì)的表達(dá)。本發(fā)明還涉及同源重組體細(xì)胞,包括初級、次級或永久化脊椎動物細(xì)胞,制備這些細(xì)胞的方法、同源重組以產(chǎn)生融合基因的方法,改變細(xì)胞中基因表達(dá)的方法,以及采用本發(fā)明的構(gòu)建體于細(xì)胞中制造蛋白質(zhì)的方法。
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國際公布
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