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改造植物細胞壁多糖結(jié)構(gòu)的方法

公開(公告)號 CN1237176C  
公開(公告)日 2006.01.18  
申請(專利)號 CN01807501.0  
申請日期 2001.02.12  
專利名稱 改造植物細胞壁多糖結(jié)構(gòu)的方法  
主分類號 C12N15/82(2006.01)I  
分類號 C12N15/82(2006.01)I;A61L27/20(2006.01)I  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán) 2000.2.10 EP 00610020.0;2000.4.7 US 09/544,988  
申請(專利權(quán))人 波利斯有限公司  
發(fā)明(設(shè)計)人 P·尤爾弗斯科夫;H·舒爾斯;R·維瑟;B·伯克哈特;S·O·瑟蘭森;R·歐曼;J-P·溫肯;M·斯克約特;C·D·沃拉跟;G·貝爾德曼  
地址 丹麥腓特列斯貝  
頒證日  
國際申請 2001-02-12 PCT/DK2001/000093  
進入國家日期 2002.09.29  
專利代理機構(gòu) 中國國際貿(mào)易促進委員會專利商標事務(wù)所  
代理人 劉曉東  
國省代碼 丹麥;DK  
主權(quán)項 提供轉(zhuǎn)基因植物材料的方法,相對于野生型狀態(tài),該轉(zhuǎn)基因植物材料的復(fù)合細胞壁多糖結(jié)構(gòu)被修飾,該修飾是總體糖苷鍵形式和單糖分布中的至少一種,該方法包括:(i)提供核酸構(gòu)建體,其含有細胞壁多糖修飾酶的編碼核苷酸序列或調(diào)節(jié)內(nèi)源細胞壁多糖修飾酶的編碼核苷酸序列表達的核苷酸序列,所述的編碼序列可操作地連接到用于其在植物中表達的5′和3′調(diào)控序列,該構(gòu)建體導(dǎo)入到植物細胞導(dǎo)致至少一種靶細胞壁多糖修飾酶的產(chǎn)量改變,(ii)用該核酸構(gòu)建體轉(zhuǎn)化植物細胞,和(iii)取得轉(zhuǎn)化植物細胞的植物細胞培養(yǎng)物、植物組織或轉(zhuǎn)基因植物,其中至少一種細胞壁多糖修飾酶的產(chǎn)量改變,以獲得轉(zhuǎn)基因植物細胞、植物組織或植株,其中因為所述基因構(gòu)建體的引入,與野生型的植株相比所述的靶底物細胞壁多糖被修飾成具有其中至少有一種單糖的比例被改變不小于10%或至少一種糖苷鍵的比例被改變不小于10%的單糖分布。  
摘要 本發(fā)明提供了制備轉(zhuǎn)基因植物及其部分的方法,相對于野生型狀態(tài)來說,該轉(zhuǎn)基因植物及其部分中的復(fù)合細胞壁多糖結(jié)構(gòu)被修飾,其中的修飾至少包括整個糖苷鍵的連接方式和單糖分布中的一種,該方法包括用能使復(fù)合細胞壁多糖修飾酶的產(chǎn)量改變的核酸序列來轉(zhuǎn)化植物細胞,所述的修飾酶包括:內(nèi)源性李糖聚半乳糖醛酸水解酶、內(nèi)源性鼠李糖聚半乳糖醛酸裂解酶、內(nèi)源性半乳聚糖酶(endo-galactanases)、內(nèi)源性阿拉伯聚糖酶、阿拉伯呋喃糖苷酶、半乳糖苷酶,如β-半乳糖苷酶、木糖苷酶和外源性半乳糖醛酸酶。修飾可以在體內(nèi)發(fā)生,也可以在采集后發(fā)生。在后一種情況下,生長的植物中的修飾酶與其底物分開,例如將酶定位到高爾基體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、液泡或以失活的形式存在于植物中。采集后,將酶與其底物接觸,或者將其激活,從而對細胞壁多糖的進行所需的采后處理。轉(zhuǎn)基因植物材料的功能也得到了提高,并將其用于食品和飼料制造,以及作為藥學(xué)或醫(yī)學(xué)活性物質(zhì)。  
國際公布 2001-08-16 WO2001/059137 英  
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