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檢測(cè)待測(cè)標(biāo)本中生存素表達(dá)量的診斷試劑、檢測(cè)方法及應(yīng)用

公開(kāi)(公告)號(hào) CN1316037C  
公開(kāi)(公告)日 2007.05.16  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN200310104060.X  
申請(qǐng)日期 2003.12.19  
專利名稱 檢測(cè)待測(cè)標(biāo)本中生存素表達(dá)量的診斷試劑、檢測(cè)方法及應(yīng)用  
主分類號(hào) C12Q1/68(2006.01)I  
分類號(hào) C12Q1/68(2006.01)I  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 葉尚勉  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 葉尚勉;葉尚蓉;羅 比  
地址 610000四川省成都市梓橦街42號(hào)3單元7號(hào)  
頒證日  
國(guó)際申請(qǐng)  
進(jìn)入國(guó)家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 成都虹橋?qū)@聞?wù)所  
代理人 李高峽  
國(guó)省代碼 四川;51  
主權(quán)項(xiàng) 用于檢測(cè)待測(cè)標(biāo)本中生存素表達(dá)量的診斷試劑,其特征在于它包含a)包被于載體上的生存素核酸片段;所述生存素核酸片段由以下方法制備:從生存素表達(dá)陽(yáng)性標(biāo)本中制備總RNA,將RNA逆轉(zhuǎn)錄為生存素表達(dá)陽(yáng)性標(biāo)本cDNA;以第一引物對(duì)為引物,以所述生存素表達(dá)陽(yáng)性標(biāo)本cDNA為模板,經(jīng)PCR擴(kuò)增制備第一產(chǎn)物;所述第一產(chǎn)物為對(duì)應(yīng)于生存素RNA序列的生存素DNA片段;以第二引物對(duì)為引物,以所述第一產(chǎn)物為模板,經(jīng)PCR擴(kuò)增制備第二產(chǎn)物,將所述第二產(chǎn)物包被于載體;b)從標(biāo)本中制備RNA和cDNA的試劑;c)從制備的cDNA中擴(kuò)增生存素的PCR引物;以及d)酶反應(yīng)試劑;其中,所述第一引物對(duì)分別含有SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2序列;所述第二引物對(duì)分別含有SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4序列;所述從制備的cDNA中擴(kuò)增生存素的PCR引物為第三引物對(duì),分別含有SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6序列;所述酶反應(yīng)試劑為抗-熒光素抗體-HRP結(jié)合物。  
摘要 本發(fā)明涉及以外周血或體液或組織為標(biāo)本,測(cè)定其中生存素轉(zhuǎn)錄水平,以生存素的表達(dá)量為標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)腫瘤的早期發(fā)生、預(yù)后和監(jiān)測(cè)的診斷試劑和方法。包括以下幾種組成成分:包被于載體上的生存素核酸片段;從標(biāo)本中制備RNA和cDNA的試劑;從制備的cDNA中擴(kuò)增生存素的PCR引物;以及酶反應(yīng)試劑。本發(fā)明的診斷試劑成為癌癥早期診斷的理想工具,本發(fā)明為癌癥病人的診斷、預(yù)后和監(jiān)測(cè)提供了有效的途徑。  
國(guó)際公布  
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