| 公開(公告)號 | CN1297670C |
| 公開(公告)日 | 2007.01.31 |
| 申請(專利)號 | CN200410083826.5 |
| 申請日期 | 2004.10.19 |
| 專利名稱 | 結核分枝桿菌耐藥基因檢測試劑盒及其制備方法 |
| 主分類號 | C12Q1/68(2006.01)I |
| 分類號 | C12Q1/68(2006.01)I;C12Q1/18(2006.01)I |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權 | |
| 申請(專利權)人 | 中國人民解放軍第三○九醫(yī)院 |
| 發(fā)明(設計)人 | 吳雪瓊;梁建琴;張俊仙;李洪敏 |
| 地址 | 100091北京市海淀區(qū)黑山扈甲十七號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進入國家日期 | |
| 專利代理機構 | 北京北新智誠知識產權代理有限公司 |
| 代理人 | 耿小強 |
| 國省代碼 | 北京;11 |
| 主權項 | 一種結核分枝桿菌耐藥基因檢測試劑盒，含有結核分枝桿菌耐藥基因檢測膜片和結核分枝桿菌耐藥基因PCR擴增試劑，其特征在于：所述結核分枝桿菌耐藥基因檢測膜片是在硝酸纖維膜上固定2個針對分枝桿菌屬和結核分枝桿菌復合群16S核糖體核糖核酸而設計的寡聚核苷酸探針，以及一系列針對結核分枝桿菌耐藥基因rpoB、katG、embB、rpsL和rrs而設計的寡聚核苷酸探針，在3’末端加有80-110個脫氧核糖核酸；所述的結核分枝桿菌耐藥基因多重PCR擴增試劑包括5-10倍PCR緩沖液，濃度各為2.5mmol/L的dGTP、dCTP、dATP和dTTP，濃度各為2.5-12.5μmol/L的5’端帶生物素標記的分枝桿菌16S rRNA、rpoB、katG、embB、rpsL和rrs基因的上游引物和不帶標記的下游引物以及1-10U/μl Taq DNA聚合酶；所述結核分枝桿菌耐藥基因多重PCR擴增試劑各組分的終濃度如下：1倍PCR緩沖液，dGTP、dCTP、dATP和dTTP的終濃度各為0.2mmol/L，5’端帶生物素標記的分枝桿菌16S rRNA、結核分枝桿菌rpoB、katG、embB、rpsL和rrs基因的上游引物和不帶標記的下游引物的終濃度各為0.2-1.0umol/L，TaqDNA聚合酶2-5U/100μl。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及一種結核分枝桿菌耐藥基因檢測試劑盒及其制備方法，根據不同分枝桿菌屬和結核分枝桿菌復合群16S核糖體核糖核酸(簡稱rRNA)而設計、合成相應的寡核苷酸探針，通過點樣法將寡核苷酸探針按一定的順序點在經預處理的硝酸纖維膜上，制成耐藥基因檢測鑒定膜片，與帶生物素標記的PCR擴增產物雜交。利用本發(fā)明，根據探針雜交的藍紫色信號強弱用肉眼判讀結果，可用于檢測臨床標本或臨床分離株中結核分枝桿菌五種抗結核藥物耐藥基因。 |
| 國際公布 |
