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一種動(dòng)物源細(xì)菌氯霉素類(lèi)藥物耐藥基因多重PCR檢測(cè)技術(shù)

公開(kāi)(公告)號(hào) CN1966718A  
公開(kāi)(公告)日 2007.05.23  
申請(qǐng)(專(zhuān)利)號(hào) CN200610022075.5  
申請(qǐng)日期 2006.10.20  
專(zhuān)利名稱 一種動(dòng)物源細(xì)菌氯霉素類(lèi)藥物耐藥基因多重PCR檢測(cè)技術(shù)  
主分類(lèi)號(hào) C12Q1/68(2006.01)I  
分類(lèi)號(hào) C12Q1/68(2006.01)I  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人 四川大學(xué)  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 王紅寧;楊 鑫;張安云;周萬(wàn)蓉;吳 琦;夏青青;田國(guó)寶  
地址 610064四川省成都市望江路29號(hào)  
頒證日  
國(guó)際申請(qǐng)  
進(jìn)入國(guó)家日期  
專(zhuān)利代理機(jī)構(gòu)  
代理人  
國(guó)省代碼 四川;51  
主權(quán)項(xiàng) 一種動(dòng)物源細(xì)菌氯霉素類(lèi)藥物耐藥基因多重PCR檢測(cè)技術(shù),含有PCR模板制備試劑和細(xì)菌耐藥基因多重PCR擴(kuò)增試劑,其特征在于:所述PCR模板制備試劑是由洗滌液、樣品處理液組成,所述細(xì)菌耐藥基因多重PCR擴(kuò)增試劑包括10倍PCR緩沖液組分為50mM KCl、pH8.3的10mM Tris.HCl和0.01%明膠,濃度均為2.5mmol/L的dGTP、dCTP、dATP和dTTP,濃度為25mM/LMgCl2,三種耐藥基因即Cat1基因、FloR基因和CmlA基因的特異性上下游引物濃度均為25mmol/L,濃度為2.5U/ULTaq DNA聚合酶和超純水。所述動(dòng)物源細(xì)菌氯霉素類(lèi)藥物耐藥基因多重PCR擴(kuò)增試劑各組分的終濃度如下:1倍PCR緩沖液,dGTP、dCTP、dATP和dTTP的終濃度均為0.25mmol/L,MgCl2的終濃度為2.5mM/L,氯霉素類(lèi)藥物耐藥基因Cat1、FloR、CmlA的終濃度分別為0.2mmol/L、0.4mmol/L、0.9mmol/L,Taq DNA聚合酶的終濃度為1.75U/100UL。  
摘要 本發(fā)明涉及一種動(dòng)物源細(xì)菌氯霉素類(lèi)藥物耐藥基因多重PCR檢測(cè)技術(shù)法,該方法包括擴(kuò)增待測(cè)細(xì)菌耐藥基因的三對(duì)PCR引物以及PCR模板制備試劑和細(xì)菌耐藥基因多重PCR擴(kuò)增試劑,利用該多重PCR檢測(cè)技術(shù)能擴(kuò)增待測(cè)菌株氯霉素類(lèi)藥的耐藥基因。它具有靈敏度高、特異性高、應(yīng)用范圍廣,結(jié)果準(zhǔn)確可靠的特點(diǎn)。  
國(guó)際公布  
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