方法名稱： |
草烏類藥用植物--活性成分含量測定—HPLC法 |
應(yīng)用范圍： |
對草烏類植物進(jìn)行質(zhì)量與資源評價(jià) |
方法原理： |
樣品以乙醚提取，液相色譜分離，在240nm處測定峰面積，外標(biāo)法計(jì)算含量。 |
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件： |
儀器設(shè)備 Shimadzu LC-10A高效液相色譜儀(日本，包括LC-0ATvp溶劑輸送泵，SCL-10Avp系統(tǒng)控制器，SPD-10Avp/10AVvp紫外-可見檢測器，CTO-10ASvp柱溫箱，DGU-12A在線真空脫氣機(jī)，Class-up工作站；AS3120A Ultrasonic Cleaner；KL-009袖珍數(shù)顯筆式酸度計(jì)。 色譜條件 色譜柱：Phenomenex ODS 柱(4.6mm ×250mm,5μm)；流動(dòng)相：乙腈-醋酸銨緩沖溶液(pH10.5)(54∶46)；流速：1.0mL/min；檢測波長：240nm；柱溫為30℃。 |
試樣制備： |
對照品溶液的制備 精密稱取對照品適量，用乙腈配制成中烏頭堿0.07g/L、烏頭堿0.034g/L、次烏頭堿0.62g/L的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。 供試樣品溶液的制備 精密稱取每個(gè)樣品400mg，置于磨口的三角瓶中，加入014mL10%的氨溶液，攪拌均勻，加入10mL乙醚，超聲30min后在補(bǔ)加5mL乙醚，放置過夜，過濾，分別用5mL的乙醚洗滌3次濾渣，合并醚液，揮干，用乙腈洗滌殘?jiān)ㄈ轂?mL，冷藏備用。 |
操作步驟： |
吸取對照品溶液和供試品溶液10μL,在上述色譜條件下，注入液相色譜儀測定，外標(biāo)法計(jì)算含量。 |
附件： |
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備注： |
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參考文獻(xiàn)： |
趙英永,崔秀明,戴云等.高效液相色譜法測定草烏類藥用植物活性成分含量.中國藥學(xué)雜志.2007,42(11):815-818 |
