方法名稱： |
車前草--桃葉珊瑚苷含量測定—HPLC法 |
應(yīng)用范圍： |
用于測定車前草中桃葉珊瑚苷含量 |
方法原理： |
車前草經(jīng)甲醇超聲提取，經(jīng)液相色譜儀分離，在206nm處測定峰面積，標(biāo)準(zhǔn)曲線法計算高車前甙含量。 |
儀器設(shè)備及實驗條件： |
儀器設(shè)備 Beckman Coulter 高效液相色譜儀；G1311AQuat泵；G1314A紫外檢測器；Agilent1100色譜工作站； 色譜條件 色譜柱：Hypersil C18柱(4. 6mmi.d.×200mm,5mm)；紫外檢測波長：206nm；流動相：乙腈-水(2∶98,V/V)；柱溫：26℃；流速：1ml/min；進(jìn)樣：10ml。 |
試樣制備： |
標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 將桃葉珊瑚苷對照品用50 %的甲醇在26.2~1045mg/ m濃度范圍內(nèi)配制成系列濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液，各精密吸取20μl，注入液相色譜儀，按照上述色譜條件測定峰面積，以進(jìn)樣量的自然對數(shù)為橫坐標(biāo)，色譜峰面積的自然對數(shù)為縱坐標(biāo)，,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 供試品溶液的制備 精密稱取車前干粉0.5g，置于磨口錐形瓶中，精密加入甲醇10ml，稱重，靜置24h，置超聲清洗機(jī)中，超聲提取1.5h，冷卻后，再稱重，補(bǔ)加甲醇至原重，過濾，棄去初濾液，收集續(xù)濾液，過0.45mm微孔濾膜，取10ml進(jìn)樣分析。 |
操作步驟： |
精密稱取車前樣品粉末0.50g，3次重復(fù)，按供試品溶液制備法提取測定，以標(biāo)準(zhǔn)曲線計算含量。 |
附件： |
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備注： |
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參考文獻(xiàn)： |
田士林,李莉.豫南地區(qū)野生車前中桃葉珊瑚苷含量測定.安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2006,34(19):4953,4988 |
