益母草流浸膏—鹽酸水蘇堿的測(cè)定—薄層掃描法

本方法采用薄層掃描法測(cè)定益母草流浸膏中鹽酸水蘇堿的含量。

本方法適用于益母草流浸膏中鹽酸水蘇堿含量的測(cè)定。

供試品經(jīng)強(qiáng)酸性陽(yáng)離子交換樹(shù)脂柱分離，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)�加甲醇溶解并定量稀釋�(zhuān)�即得供試品溶液，鹽酸水蘇堿對(duì)照品加甲醇溶解并定量稀釋。點(diǎn)樣、展開(kāi)，以乙酸乙酯-正丁醇-鹽酸（1：8：3)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，涼干，并在105℃加熱15分鐘，放冷，噴以稀碘化鉍鉀試液-1%三氯化鐵乙醇溶液（10：1)混合溶液至斑點(diǎn)顯色清晰，用薄層掃描儀進(jìn)行掃描，于波長(zhǎng)λ_S=510nm，λ_R=700nm測(cè)得供試品吸光度的積分值與對(duì)照品吸光度的積分值，計(jì)算其含量。

1. 鹽酸

2. 正丁醇

3. 乙酸乙酯

1 儀器

1.1薄層掃描儀

1.2涂布器

應(yīng)能使吸附劑在玻璃板上手工或自動(dòng)涂成一層符合厚度要求的均勻薄層。

1.3點(diǎn)樣器

一般采用微升毛細(xì)管或與之相應(yīng)的點(diǎn)樣器材。

1.4展開(kāi)室

可用適合薄層板大小的專(zhuān)用玻璃缸，底部雙槽，蓋子須密閉。

2 材料

2.1玻板

用10cm×10cm、10cm×15cm、20cm×10cm或20cm×20cm的規(guī)格，要求光滑、平整，洗凈后不附水珠，晾干。

2.2吸附劑

硅膠G，其顆粒大小一般要求直徑為10～40μm。

1. 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取鹽酸水蘇堿對(duì)照品適量，加甲醇制成每1mL含2mg溶液，作為對(duì)照品溶液。

2. 供試品溶液的制備

取供試品，精密稱取約5g，用稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至1~2，置強(qiáng)酸性陽(yáng)離子交換樹(shù)脂柱上，以每分鐘8mL的速度用水洗至流出液近無(wú)色，棄去水液，再以每分鐘2mL的速度用2mol/L的氨水溶液150mL洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)�加甲醇溶解轉(zhuǎn)移至10mL量瓶中，并定量稀釋之刻度，作為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

1. 薄層板制備

將吸附劑1份和水3份在研缽中向一方向研磨混合，去除表面的氣泡后，倒入涂布器中，在玻板上平穩(wěn)地移動(dòng)涂布器進(jìn)行涂布（厚度為0.25～0.5mm)取下涂好薄層的玻板，于室溫下，置水平臺(tái)上晾干，在反射光及透射光下檢視，表面應(yīng)均勻，平整，無(wú)麻點(diǎn)、無(wú)氣泡、無(wú)破損及污染，于110℃烘30分鐘，冷卻后立即使用或置干燥箱中備用，或用商品預(yù)制板。

2. 點(diǎn)樣

精密吸取供試品溶液 8μL、對(duì)照品溶液 3μL與 8μL，分別交叉點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，如用點(diǎn)樣器點(diǎn)樣到薄層板上，一般為圓點(diǎn)，點(diǎn)樣基線距底邊1.0～1.5cm，樣點(diǎn)直徑一般不大于2mm，點(diǎn)間距離可視斑點(diǎn)擴(kuò)散情況以不影響檢出為宜。點(diǎn)樣時(shí)必須注意勿損傷薄層表面。

3. 展開(kāi)

將點(diǎn)好樣品的薄層板放入展開(kāi)缸的展開(kāi)劑中，以乙酸乙酯-正丁醇-鹽酸（1：8：3)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干。

4. 含量測(cè)定

在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板，周?chē)�用膠布固定，選擇反射方式，采用吸收法，進(jìn)行掃描，于波長(zhǎng)λ_S=510nm，λ_R=700nm測(cè)得供試品吸光度的積分值與對(duì)照品吸光度的積分值，計(jì)算其含量

用外標(biāo)法測(cè)定時(shí)，若對(duì)照品各數(shù)據(jù)點(diǎn)在校正曲線上呈一通過(guò)原點(diǎn)的直線時(shí)，可用一點(diǎn)法校正，如不通過(guò)原點(diǎn)通常宜采用二點(diǎn)法校正，必要時(shí)用多點(diǎn)法校正。

中華人民共和國(guó)藥典，國(guó)家藥典委員會(huì)編、化學(xué)工業(yè)出版社，2005年版，一部p.280。