維生素K1的測(cè)定—高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測(cè)定維生素K1的含量。

本方法適用維生素K1。

供試品和內(nèi)標(biāo)均制成流動(dòng)相溶液，進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)254nm處檢測(cè)維生素K1（C₃₁H₄₆O₂)和內(nèi)標(biāo)鄰苯二甲酸二甲酯的吸收值，計(jì)算出其含量。

1.石油醚

2. 正己烷

1. 稱取供試品

取本品20mg，精密稱定，置50mL量瓶中。

2. 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取維生素K1對(duì)照品適量，與供試品同法配制。

3. 內(nèi)標(biāo)溶液的制備

取苯甲酸膽甾酯37.5mg，置25mL量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，即得。

4. 供試品溶液的制備

上述供試品加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取上述溶液5mL與內(nèi)標(biāo)溶液各1mL，置10mL量瓶中，以流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

分別精密吸取上述供試品溶液與對(duì)照品溶液，10μL 注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)254nm處測(cè)定維生素K1和內(nèi)標(biāo)苯甲酸膽甾酯的吸收值，按內(nèi)標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得。

中華人民共和國(guó)藥典，國(guó)家藥典委員會(huì)編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005年版，二部，p676。